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蠟狀芽胞桿菌引起軍曹魚(yú)大批死亡的報(bào)告

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  幾年來(lái),隨著國(guó)內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的蓬勃發(fā)展,養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)品種在不斷增加,新的魚(yú)類(lèi)疾病也在不斷出現(xiàn),魚(yú)病防治已成為魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖的首要問(wèn)題。1999年8月海南省臨高縣新盈港某養(yǎng)殖公司養(yǎng)殖的軍曹魚(yú)苗大規(guī)模發(fā)病死亡,對(duì)送檢樣品進(jìn)行解剖,并經(jīng)細(xì)菌分離、培養(yǎng)和鑒定,認(rèn)為本次魚(yú)病是由蠟狀芽胞桿菌引起。

  一、發(fā)病情況

  1999年7月,海南省臨高縣新盈港某養(yǎng)殖公司從三亞引進(jìn)軍曹魚(yú)苗5萬(wàn)多尾,置于海灣的網(wǎng)箱中養(yǎng)殖,魚(yú)苗是三亞某公司從國(guó)外引進(jìn)的,當(dāng)時(shí)氣溫高37℃-38℃,水溫32℃-34℃,魚(yú)苗入箱未經(jīng)消毒。經(jīng)20-25天飼養(yǎng)后,魚(yú)苗陸續(xù)發(fā)病死亡。據(jù)技術(shù)員提供信息,投喂各種魚(yú)病常用藥物和使用多種消毒藥類(lèi)均無(wú)效。半個(gè)多月,已死亡約3萬(wàn)多尾,死亡率約60%。

  二、臨床癥狀及病理變化

  據(jù)養(yǎng)殖人員介紹,魚(yú)苗在網(wǎng)箱中養(yǎng)殖20天后,開(kāi)始出現(xiàn)死亡,發(fā)病個(gè)體不攝食,游動(dòng)遲緩,長(zhǎng)時(shí)間浮于水面,體色深發(fā)黑,其中有一部分眼球發(fā)白似人們常說(shuō)的白內(nèi)障,眼突出,頭大,解剖檢查病魚(yú),魚(yú)體腹部扁瘦,解剖后發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)無(wú)食物,腸道明顯充血,肝臟有出血點(diǎn),剖開(kāi)瞎眼個(gè)體的眼球,其內(nèi)容物如豆腐狀。

  三、細(xì)菌學(xué)檢查

  1.鏡檢

  無(wú)菌條件下取病魚(yú)的眼、肝、腸內(nèi)容物直接涂片后,采用革蘭氏染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)涂片上有大量革蘭氏陽(yáng)性球桿菌,也有兩端較平的粗桿菌和鏈狀桿菌。

  2.分離培養(yǎng)

 ?。?)直接培養(yǎng)和增菌培養(yǎng)

  用接種環(huán)無(wú)菌分別接取魚(yú)的眼球內(nèi)容物、肝臟直接接種于3.5%NaCl肉湯瓊脂平板,在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),同時(shí)在3.5%NaCl營(yíng)養(yǎng)肉湯中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。同樣取眼球內(nèi)容物、肝臟置于3.5%NaCl肉湯中在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),培養(yǎng)后肉湯渾濁,液面上形成一層菌膜。取培養(yǎng)液分離于3.5%NaCl的肉湯瓊脂平板上,在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),培養(yǎng)結(jié)果顯示,直接分離培養(yǎng)在3.5%NaCl肉湯瓊脂平板上的菌落較大,約3-4mm,增菌后再分離培養(yǎng)的菌落較小,約2-3mm。直接分離培養(yǎng)的細(xì)菌在培養(yǎng)12小時(shí)左右,菌落表面光滑,乳白色,取菌落染色、革蘭氏陽(yáng)性,為球桿菌;取肉湯培養(yǎng)液染色,革蘭氏陽(yáng)性,為鏈狀球桿菌和牙胞桿菌;培養(yǎng)18-24小時(shí)后,平板上菌落為融蠟狀,乳白色,不光滑菌落,革蘭氏染色,為陽(yáng)性菌,且為芽胞桿菌,芽胞不突出于菌體橫經(jīng)。

  (2)接種培養(yǎng)

  從肉湯瓊脂平板上取單個(gè)菌株接種于3.5%NaCl三糖鐵、3.5%半固體瓊脂以及綿羊血平板,37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),從顯示結(jié)果表明,該菌分解葡萄糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣、不產(chǎn)H2S、有動(dòng)力、α溶血。

  (3)生化鑒定

  生化鑒定項(xiàng)目參照何曉青主編的《衛(wèi)生防疫細(xì)菌檢驗(yàn)》的有關(guān)項(xiàng)目進(jìn)行,其結(jié)果如下表:

  明膠 葡萄糖 麥芽糖 蔗糖 水揚(yáng)苷 蕈糖 乳糖 甘露醇 鼠李糖 木膠糖 動(dòng)力

  ±  +  ?。?  +  ±  ?。? - ?。?  -  ?。? ?。?/p>

  (4)藥敏試驗(yàn)利用瓊脂擴(kuò)散法對(duì)分離出來(lái)的菌落做了11種藥物敏感性試驗(yàn),藥物分別為:丁胺卡那、復(fù)方新若明、羧芐青霉素、氨卡青霉素、青霉素、氯霉素、鏈霉素、先鋒V、氟哌酸、慶大霉素、紅霉素,試驗(yàn)結(jié)果表明,該菌落對(duì)慶大霉素、復(fù)方新若明、紅霉素三種藥物敏感。對(duì)其它藥物不太敏感,或具有耐藥性。

  四、治療

  根據(jù)魚(yú)苗發(fā)病特征,體質(zhì)差及氣溫高等特點(diǎn),采用防與治相結(jié)合措施:①把網(wǎng)箱移至水較深、海水易交換的水體,改善水環(huán)境。②飼料中加入藥物,慶大霉素每公斤魚(yú)體重用0.3g,強(qiáng)力霉素每公斤魚(yú)體重加0.6g,同時(shí)配合維生素A、維生素C、維生素E及復(fù)合維生素B,每公斤魚(yú)體重各加0.1-0.2g,每天投喂2次,連續(xù)一周。③禽用紅霉素進(jìn)行魚(yú)體及網(wǎng)箱內(nèi)消毒。在網(wǎng)箱周?chē)鷴齑?,使網(wǎng)箱內(nèi)水體成0.3ppm濃度。

  用以上方法治療,4-5天后,死魚(yú)由原來(lái)的每天一百多條減少到每天十幾條,一星期后,病情得到控制。

  五、小結(jié)和討論

  根據(jù)臨床癥狀,病理變化和細(xì)菌學(xué)診斷結(jié)果,可初步判定這是一起由臘狀芽胞桿菌引起的細(xì)菌性魚(yú)病。蠟狀芽胞桿菌為條件致病菌,廣泛存在于空氣、土壤、污水、腐爛草中,并易污染各種食品飼料,軍曹魚(yú)苗發(fā)病的原因,可能是:①魚(yú)苗在大密度環(huán)境中運(yùn)輸,體有外傷,在魚(yú)苗入箱時(shí),沒(méi)有及時(shí)做消毒處理,為細(xì)菌等病原菌的感染提供了路徑;②魚(yú)苗在一個(gè)月時(shí)間內(nèi)從國(guó)外到飼養(yǎng)地曾兩次改變飼養(yǎng)環(huán)境,魚(yú)苗體質(zhì)減弱,抵抗病菌能力下降;③7-8月間,養(yǎng)殖地連續(xù)大雨,氣溫變化大,抵抗力較低的魚(yú)苗易為病菌感染;④7-8月氣溫較高,空氣溫度大,飼料中的各種維生素較易氧化變質(zhì),而在魚(yú)苗飼養(yǎng)管理中沒(méi)有適當(dāng)添加各種維生素和微量元素,提高魚(yú)苗的抗病力。多種綜合因素的作用下,透發(fā)了該病,發(fā)病魚(yú)苗的典型癥狀是體瘦,約半數(shù)有瞎眼病。這是一種極為少見(jiàn)的魚(yú)病,發(fā)病后傳染率高,治療不及時(shí),可能導(dǎo)致全軍履滅。

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