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　　1 范圍

　　本標準規(guī)定了蘋果無病毒苗木的繁育規(guī)程，適用于全國各蘋果苗木產(chǎn)地及栽培區(qū)。

　　2 引用標準

　　下列標準所包含的條文，通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標準出版時，所示版本均為有效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應(yīng)探討使用下列標準最新版本的可能性。

　　GB 12943－91 蘋果無病毒母本樹和苗木檢疫規(guī)程

　　NY 329－1997 蘋果無病毒苗木

　　3 定義

　　本標準采用下列定義。

　　3.1 蘋果無病毒原種

　　蘋果品種和砧木，經(jīng)過脫毒處理、田間選拔、直接引進經(jīng)檢測后，確認不帶已知病毒或指定病毒的原始植株。

　　3.2 蘋果無病毒苗木繁育體系

　　經(jīng)國家或省（市、區(qū)）主管部門核準，由不同單位組成的完成蘋果無病毒苗木生產(chǎn)的各層次、各環(huán)節(jié)任務(wù)的組織整體。

　　4 繁育體系

　　4.1 蘋果無病毒苗木的繁育，必須根據(jù)種苗法（在未制定種苗法前，根據(jù)農(nóng)業(yè)部《果樹種子苗木管理暫行辦法》的規(guī)定）實施。

　　4.2 在全國和各省（市、區(qū)）建立各級無病毒苗木繁育體系，確保無病毒苗木的質(zhì)量合格。

　　4.3 蘋果無病毒苗木繁育體系包括無病毒原種保存圃、無病毒母本園及無病毒苗木繁殖圃等三部分。

　　4.4 蘋果無病毒原種保存圃。

　　4.4.1 蘋果無病毒原種保存圃承擔無病毒原種的培育、保存的任務(wù)，負責進行主要蘋果品種和砧木的脫毒、培育和從國內(nèi)外引進無病毒原種，向無病毒母本園提供無病毒蘋果品種、無性系砧木原種，協(xié)助母本園單位建立無病毒 品種采穗圃，砧木采種園和無性系砧木壓條圃。

　　4.4.2 國家和省無病毒原種保存圃由農(nóng)業(yè)部確認。

　　4.5 蘋果無病毒母本園。

　　4.5.1 無病毒母本園包括無病毒蘋果品種采穗圃、無病毒砧木采種園、無病毒無性系砧木壓條圃。

　　4.5.2 母本園承擔單位由農(nóng)業(yè)部和各?。ㄊ小^(qū)）主管部門核準認定。

　　4.5.3 母本園的繁殖材料由原種保存單位提供，并接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，一旦發(fā)現(xiàn)問題立即更換。

　　4.5.4 母本園承擔單位負責向育苗單位供應(yīng)各種無病毒品種接穗、砧木種子和苗木。

　　4.6 蘋果無病毒苗木繁殖圃。

　　4.6.1 繁殖圃種子、無性系砧木繁殖材料和接穗，都必須來自無病毒母本園，不允許從苗木上采接穗進行以苗繁苗。

　　4.6.2 蘋果無病毒苗木繁育單位負責無病毒實生砧、無性系砧木的繁殖和嫁接栽培品種，向生產(chǎn)單位供應(yīng)蘋果無病毒苗木。

　　4.6.3 蘋果無病毒苗木繁育單位由省主管部門核準認定，并頒發(fā)蘋果無病毒苗木生產(chǎn)許可證，同時還應(yīng)有上級主管部門根據(jù)母本園提供接穗量確定的無病毒苗木準產(chǎn)數(shù)量證明。

　　5 檢測機構(gòu)

　　5.1 蘋果病毒檢測機構(gòu)由國家主管部門組織技術(shù)監(jiān)督部門進行計量認證，并由農(nóng)業(yè)部確認。

　　5.2 蘋果病毒檢測機構(gòu)負責對蘋果無病毒原種保存圃的病毒檢測。

　　6 原種培育和保存

　　6.1 待脫毒材料

　　6.1.1 凡準備進行脫毒處理的品種和砧木均應(yīng)是通過國家或省農(nóng)作物品種審定委員會審定的品種和砧木。

　　6.1.2 選取經(jīng)3年以上觀察未發(fā)現(xiàn)過銹果病、綠皺果病和花葉病癥狀的結(jié)果樹作為待脫毒材料母本樹，從其上采集接穗作為待脫毒材料。

　　6.1.3 待脫毒材料母本樹可直接通過病毒檢測篩選確定為無病毒原種，病毒檢測方法見NY 329－1997中的第5章。

　　6.2 脫毒處理

　　66.3 脫毒材料的病毒檢測

　　6.3.1 經(jīng)脫毒處理獲得的材料先通過血清學(xué)方法進行檢測，顯陽性反應(yīng)的汰除，顯陰性反應(yīng)的再采用木本指示植物法進行檢測。

　　6.3.2 血清學(xué)方法和木本指示植物法的具體操作步驟分別見NY 329－1997中的附錄A和附錄B、附錄Ｃ。

　　6.4 無病毒原種的保存

　　6.4.1 蘋果品種和砧木，經(jīng)過脫毒處理和病毒檢測后，確認無病毒后即可作為無病毒原種，保存在培育原種的單位，保存的方式有田間原種保存圃和組培保存，有條件建立基因庫保存。

　　6.4.2 田間原種保存圃：無病毒原種樹要栽植在未曾栽植過果樹的地段，與普通果樹或苗木的隔離帶至少50m。栽植密度行距3m以上，株距2m以上。

　　6.4.3 組培保存：由組織培養(yǎng)方法獲得的無病毒原種可以保留在瓶內(nèi)繼代培養(yǎng)。如果需用接穗，可以擴繁幾代，移至田間。

　　6.4.4 無病毒原種樹每5年應(yīng)進行一次病毒檢測，發(fā)現(xiàn)問題即汰除。檢測機構(gòu)要將病毒檢測結(jié)果報告主管部門。

　　7 母本園

　　7.1 無病毒蘋果品種采穗圃

　　7.1.1 母本樹由無病毒原種保存圃提供，明確記載品種，引進品種外文名稱、品系、株系、砧木、原母株株系、引進單位、來源、時間、脫毒、病毒檢測的單位、時間。

　　7.1.2 按品種、株系成行栽植，行距4～5m，株距3～4m。同一株系按順序編號，栽植在一起，定植后繪制采穗圃各品種、品系、株系分布圖，并做好標記，不得混雜。

　　7.1.3 要加強肥水管理，保證樹勢健壯，每年產(chǎn)生一定數(shù)量充實的接穗，同時亦要求正常結(jié)果，以觀察果實的園藝性狀。

　　7.2 蘋果無病毒砧木采種園

　　7.2.1 砧木種類按各蘋果產(chǎn)區(qū)適用的砧木確定。

　　7.2.2 所用種子必須從無病毒母株上采集。

　　7.3 蘋果無病毒無性系砧木壓條圃

　　7.3.1 母本樹來源于無病毒原種保存圃，栽植母本樹之前應(yīng)進行土壤消毒，防止線蟲和根癌病危害。并要每年平茬，保持從基部萌生技條的能力。

　　7.3.2 無性系砧木繁殖方法有垂直壓條和水平壓條等，其方法與普通砧木苗相同。

　　7.3.3 無病毒無性系砧木壓條圃只提供無性砧木自根苗和用作中間砧的接穗，不允許在壓條圃嫁接。

　　7.4 蘋果無病毒母本園的建立

　　7.4.1 園地應(yīng)選擇未曾栽植過果樹的地段，且與一般果樹或苗木相距50m以上。建園前按無病毒蘋果品種采穗圃、砧木采種園和無性系砧木壓條圃進行區(qū)劃。設(shè)計好排灌系統(tǒng)、道路、建筑物等，并進行土地平整和土壤改良。

　　7.4.2 母本樹的栽植技術(shù)與一般生產(chǎn)園相同。

　　7.5 蘋果無病毒母本園的病毒檢測

　　7.5.1 凡發(fā)現(xiàn)母本樹有顯性病毒癥狀，應(yīng)立即撥除消毒。

　　7.5.2 每5年隨機抽樣進行潛隱性病毒檢測一次，一旦發(fā)現(xiàn)病毒癥狀，應(yīng)立即淘汰。

　　7.5.3 母本樹登記一次有效期為5年。

　　7.6 蘋果無病毒母本園的技術(shù)檔案

　　7.6.1 每年記載各品種、株系的生長量（干周、樹高、枝展、新梢生長量）、始花、始果年齡、產(chǎn)量、果實大小、色澤等，逐年記載，不得間斷和遺漏。

　　7.6.2 記錄母本園向外提供的蘋果品種接穗、無性系砧木苗、砧木種子、種類、品種（或類型）、數(shù)量和接收單位。

　　8 苗木繁育

　　8.1 苗圃的建立

　　8.1.1 苗圃地選擇：選擇地勢平坦，有灌溉條件，土壤肥沃，有機質(zhì)含量豐富，酸度適中，距一般蘋果、梨園或一般生產(chǎn)性苗圃50m以上，或5年沒有種植過蘋果、梨或育蘋果、梨苗，交通方便的地方。

　　8.1.2 苗圃規(guī)劃和建設(shè)：苗圃規(guī)劃應(yīng)從便于管理的角度出發(fā)，劃分為若干小區(qū)。規(guī)劃出實生苗播種區(qū)、無性系砧木繁殖區(qū)、成苗培養(yǎng)區(qū)以及休閑區(qū)等。并按規(guī)劃設(shè)計出各級道路、排灌系統(tǒng)，并統(tǒng)籌安排，平整土地，改良土壤，以及增施有機肥。

　　8.2 實生砧木培育

　　8.2.1 砧木種子必須采自無病毒砧木采種園或經(jīng)病毒檢測確認無病毒的種子。秋季或早春播種。播前每畝施有機肥2500～3000㎏，磷肥100㎏，深翻土地，平整作畦，施用殺菌劑和殺蟲劑，進行土壤消毒。

　　8.2.2 播種方法和田間管理與一般生產(chǎn)性苗圃相同。

　　8.3 無性系砧木培育

　　8.3.1 無性系砧木繁殖材料，必須來自無病毒母本園。

　　8.3.2 繁殖方法：

　　a) 直接從無病毒母本園引進無性系砧木自根苗，經(jīng)過一年集中培育，秋季嫁接栽培品種；

　　b) 從無病毒母本園采集無性系砧木種條，嫁接在無病毒的實生砧木上，準備培養(yǎng)中間砧木，然后再嫁接無毒品種接穗；

　　c) 用組織培養(yǎng)方法快速繁殖無病毒無性系砧木。

　　8.4 嫁接苗的管理

　　8.4.1 接穗的采集：接穗必須從無病毒蘋果品種采穗圃采集，剪下的接穗立即剪去葉片，按株分扎成捆，并登記母本樹的品種（品系）名稱、采集時間。

　　8.4.2 嫁接：秋季采用芽接法，春季采用枝接法，接后要按品種、品系分別記載。補接時，必須保證與原來嫁接的母株相同，否則不予補接。