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在天然的水域中,性腺發(fā)育成熟的細鱗鯧,在一定的水流速度、水溫和水位變化等生態(tài)環(huán)境條件的刺激下,親魚本身分泌促性腺激素,可以使卵巢或精巢完成整個成熟、排卵或排精過程。而在池塘中養(yǎng)殖的細鱗鯧親魚,很難用人工模擬的生態(tài)環(huán)境條件使親魚自然繁殖。因此,生產上采用人工注射激素,促使雌親魚卵子成熟、排卵和產卵,促使雄親魚精子成熟并排精。催產技術水平直接影響催產率、受精率和孵化率。因此,必須嚴格按照操作規(guī)范和技術要求進行人工催產。
早在1977年,Godinho等人用絨毛膜促性腺激素(HCG)催產細鱗鯧首獲成功,并進行了早期胚胎的發(fā)育觀察;爾后,在1981年Castagnolli和Donaldson用鮭魚腦垂體精制品(SG-G100)、1985年Romagosa等人用鮭魚腦垂體粗制品(SPE)、1986年Bernardina等人用促黃體素生成素釋放激素類似物(LRH-A2)分別對細鱗鯧進行催產,均獲得了成功。
浙江省淡水水產研究所,于1999年7月在我國對細鱗鯧進行人工繁殖,首次獲得了成功。
?。ㄒ唬┯H魚的選擇
為了確保催產成功,必須對雌、雄親魚的成熟度進行選擇,只有成熟的親魚,在適宜水溫、水位、催產劑和催產技術等條件;才能夠正常排卵或排精、人工授精。一般可根據親魚的外表或與挖卵觀察相結合的方祛來鑒別親魚成熟度。
1.外形鑒別 細鱗鯧在性成熟之前;很難分辨雌雄。達到性成熟時,雌魚個體較大,腹部膨大,后腹部柔軟而富有彈性,腹部兩側卵巢輪廓明顯,生殖乳突大,呈紫紅色。這樣的雌魚,符合催產條件。如果前腹部飽滿,后腹部小且不柔軟的雌魚,還不成熟。腹部過于柔軟松馳的雌親魚,則為卵巢被吸收退化的親魚;性成熟的雄親魚,個體相對較小,腹部狹窄,生殖器呈三角形凹入,若輕壓腹部有較多乳白色的精液流出,則說明魚體成熟度好,可進行催產。如輕壓雄親魚后腹部,擠不出精液或擠出少量精液且精液入水后成細線狀不散開,這說明雄親魚尚未完全成熟,不能選用。
2.挖卵觀察 為了更準確地鑒別雌性親魚的成熟度,還可采用挖卵器取卵檢查。挖卵器可用塑料管、銅桿或鴨鵝毛管制成,在前部為挖取槽長1.5厘米、寬為0.3厘米的小孔。用挖卵器輕輕插入雌親魚生殖孔,當挖卵器順利地插入魚體生殖孔23厘米后,慢慢轉動1周,再輕輕抽出挖卵器,即可取出卵粒。若生殖孔太緊,表明雌親魚成熟度差,此時不應再用力插入。卵粒用顯微鏡檢查,卵子為翠綠色,卵粒大小均一、流動自如,卵徑為939.0微米的卵,受精率高。這類的卵子,在排卵之前卵徑會增大到1001.6微米。
細鱗鯧親魚的繁殖力與年齡成正比,3齡的細鱗鯧雌親魚,絕對懷卵量為297308粒/尾,4齡的細鱗鯧雌親魚,絕對懷卵量為377643粒/尾。
?。ǘ┐菩叟浣M
在催產之前,有計劃地搭配雌雄親魚的數(shù)量,即為配組。為了有利于細鱗鯧親魚產卵和受精,生產上一般采用雄親魚的數(shù)量多于雌親魚,雌雄親魚之比為1:2。配組時要注意:參加同批催產雌雄親魚的個體大小,應盡可能相近。
?。ㄈ┐弋a劑及注射量
目前常用的催產劑有:腦垂體(PG)、絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素生成素釋放激素類似物(LRH-A2)、地歐酮(DOM)和混合激素等。
催產劑的種類和催產劑的有效劑量,要根據親魚的數(shù)量、成熟度、性別和個體大小,以及催產時間、水溫等情況進行選用。在催產早期或水溫低或親魚成熟度差的情況下,催產劑量應適當增加;反之,則應適當減少。已有資料證明,采用兩針注射法,兩針間隔6小時與12小時,具有相同的催熟效果。這表明催熟率由第一針所決定,第二針對誘導排卵非常有效。
?。ㄋ模┐弋a方法
細鱗鯧常用的催產方法是:先注射少量催產劑進行催熟,然后間隔一段時間后,再注射催產劑進行催產。即:通常所說的兩次注射法。
1.催產劑的準備 腦垂體(PG)用干凈的研缽將其研成粉末,研的越細越好;然后用生理鹽水配制成懸濁液。絨毛膜促性腺激素(HCG)及促黃體素生產素釋放激素類似物(LRH-A2)用生理鹽水溶解備用。一般按催產親魚的體重,計算出催產劑的總用量,再增加5%10%的補充配制和作為注射時的損耗。注射的生理鹽水用量,一般每尾親魚每次注射2毫升,不宜過濃或過稀,以免影響催產效果。
2.注射方法 體腔注射和肌肉注釋均可,生產上多采用體腔注射。注射前要先將注射器、針頭用水煮開消毒。體腔消毒時,一般在胸鰭或腹鰭基部無磷凹入部位進針,深度為11.5厘米,注意不能刺傷心臟,將注射液慢慢地注入。肌肉注射部位是在側線與背鰭之間,注射時要用針頭挑起鱗片,并順著鱗片向前刺入肌肉中,或從背鰭基部后方無鱗處與鰭條平行進針,深度為1.52厘米。兩針針距為814小時。
?。ㄎ澹┬獣r間與發(fā)情
從末次注射催產劑到發(fā)情產卵的時距,稱為效應時間。效應時間的長短,與水溫、催產劑種類、注射次數(shù)、劑量和親魚性腺成熟度等密切相關,尤其是與水溫、催產劑種類和劑量關系*。一般水溫高,效應時間短;反之,則長。注射腦垂體,比注射其他催產劑效應要快。細鱗鯧親魚催產后,放入水溫為2330℃的微流水催產池中,效應時間為714小時,在其*繁殖水溫2528℃時,效應時間為810小時。
親魚注射催產劑入池后,先是各自漫游,到效應時間后,雄親魚開始追逐雌親魚,即為發(fā)情。到發(fā)情高潮時,親魚在水中興奮急游,激水成浪花,或拔水出聲。沖水對親魚發(fā)情有一定的刺激作用,一般在發(fā)情前2小時,加大產卵池中水的流速,促進親魚追逐、產卵或排精等生殖活動。發(fā)情后和產卵時,給以微流水。
?。┳匀划a卵與人工授精
1.自然產卵 發(fā)情的細鱗鯧親魚達到高度興奮時,雌雄親魚急速游動,身體緊貼或扭在一起,最后雌、雄親魚腹部緊貼,胸鰭張開靠攏,尾柄互相勾緊,此時,雌親魚產卵,雄親魚射精,并借鰭以攪動水流。使卵、精充分接觸而受精。
2.人工授精 由人工采卵、采精、授精,以獲得受精卵的方法稱為人工授精。為提高人工授精率,首先必須準備判斷親魚發(fā)情產卵的時間,適時捕魚采卵、采精;其次,進行人工授精時,要求掌握比較熟練的操作技術。一般人工授精的方法有干法、半干法和濕法3種,其中干法授精最為常用。具體做法是:
?。?)采卵 在親魚催產后,雌、雄親魚追逐激烈時,或達到效應時間雌、雄親魚仍無追逐現(xiàn)象時,均需及時檢查雌親魚是否產卵。檢查可在水中進行,將魚體腹部朝上,用手輕壓腹部,若有較多的卵子從生殖孔產出,即可進行采卵。如產卵不多時,可將親魚暫養(yǎng)約半小時后再進行采卵。
采集魚卵的顏色,如呈青灰色,游離,大小均勻,卵粒飽滿、圓整,吸水快,膨脹均勻且脹足,卵巢液呈黏稠狀、量適中,此為優(yōu)質卵,受精率高;如卵粒呈暗淡色,帶“白卵”,卵球大小不均勻,彈性差或無彈性,卵膜易破裂,吸水慢且不完全,卵巢液少或多似水、無黏性,此為成熟不良的卵或為過熟的卵,受精率低或不受精。
(2)采精 成熟雄親魚的精液,一般隨時均可采集。精液如呈乳白色、黏稠狀,則為優(yōu)質精液;如精液較稀、略帶黃色,則一般為過熟,質量不佳。精液的采集,一般用510毫升的針筒(不帶針頭)吸入人工擠出的精液儲存?zhèn)溆?。精液也可預先采集,放入保存液中。保存液配方為葡萄糖2.9克、檸檬酸鈉1.0克、碳酸氫鈉0.2克、氯化鉀0.03克、磺胺0.3克,另加蒸餾水100毫升,進行制備。保存時,將新鮮的精液,加入3倍保存液進行稀釋,再逐步降溫至3℃,放入冰箱或保溫瓶內保存?zhèn)溆?。一般精子可成?015天,使用時待溫度上升后即可用于人工授精。
?。?)干法授精 將成熟排卵的雌親魚及成熟雄親魚起捕,用干毛巾抹去親魚魚體及泄殖孔部位的水分,將雌親魚的卵子擠入擦干的白搪瓷盆中,同時將雄親魚對著容器擠入精液或將提前采集好的精液注入其中,立即用羽毛或手均勻攪拌l2分鐘,加入少量生理鹽水后再輕輕攪拌,受精過程便在此時進行。在人工授精過程中,切忌陽光直射,以免紫外線殺死精子,影響受精率。
三、孵化
受精卵在適宜的環(huán)境條件下,經過一系列的變化,最后破膜而出,變成魚苗,這就是胚胎發(fā)育過程。生產上所講的孵化,實際上包括了魚苗下塘前的整個時期。細鱗鯧的受精卵孵化,在流水中進行。
(一)胚胎發(fā)育
受精卵的孵化,當水溫為2528℃時,破膜時間為1620小時;當水溫為29℃時,破膜時間為13小時。剛出膜的魚的長度為56毫米。
1.受精卵 細鱗鯧卵粒呈青灰色,無黏性,卵膜薄而透明,屬漂浮性魚卵。剛產出的卵粒,直徑為1.11.2毫米。每克重的卵,含卵9001000粒。受精卵吸水30分鐘后,膨脹到56毫米。
2.胚胎發(fā)育 浙江省淡水水產研究所巴西新品種課題組科研人員,1999年對細鱗鯧的胚胎發(fā)育進行了初步觀察與測量。
孵化出膜的魚苗,再經過45天的孵化,魚苗的腰點明顯,卵黃囊即將被吸收完畢,消化道貫通,此時魚苗即可準備下塘,進入魚苗培育階段。
?。ǘ┓趸O備
細鱗鯧人工繁殖常用的孵化設備有:孵化缸、孵化桶和孵化環(huán)道等。
1.孵化桶(缸) 孵化桶一般由鍍鋅鐵皮焊接而成,呈漏斗狀,由桶體、過濾罩、支架和進出水管等部分組成。水經缸底流入把卵沖起,使卵不停地上下翻滾,呈懸浮狀態(tài),孵化水則由過濾罩過濾流出,通過出水口流走。孵化缸一般用水缸改制而成,進水則通過缸中間的導管,由導管上部進水至底部泛起,使卵不停翻滾,水再經濾罩流出。每立方米水體可放受精卵80萬120萬粒。
2.孵化環(huán)道 適宜大規(guī)模生產的大型孵化設備,多為磚砌水泥砂漿抹面結構的孵化環(huán)道,小型的也有用塑料或白鐵皮制成,一般環(huán)道為23環(huán),也有單環(huán)或3環(huán)以上的。進水管設在環(huán)道底部,水在環(huán)道中環(huán)流,然后以內溢或外溢的方式經排水管排出,進排水各成系統(tǒng),均由設在環(huán)道外的閘閥控制。為了防止水流出現(xiàn)死角,放卵密度不宜過大,一般每立方米水體以放卵100萬120萬粒為宜。
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1.選擇孵化用水 在選擇孵化用水時,要求水質清新,無毒、無污染、無敵害生物,含氧量在5毫克/升以上,酸堿度適中,pH6.57.5。
2.預防敵害生物 由于初出膜的魚苗十分嬌嫩,器官發(fā)育不全,對外界不良環(huán)境的抵抗能力差,易被生物敵害殘殺,故進水時應先用120目的尼龍篩絹過濾,防止水中的劍水蚤、水蚤、水生昆蟲的成蟲和幼蟲對魚卵、魚苗造成危害。
3.水溫要求 細鱗鯧受精卵孵化在不同的水溫條件下,其胚胎發(fā)育的速度也不同。在一定的水溫范圍內,隨著水溫的升高,而孵化時間將縮短。當孵化水溫低于或高于所需水溫或水溫驟變,都會造成胚胎發(fā)育停滯,或畸形胚胎增多,影響孵化出苗率。細鱗鯧受精卵的最適孵化水溫為2528℃。
4.溶解氧 胚胎發(fā)育需要氧氣供應,且隨著發(fā)育進程需氧量逐漸增加。在生產上要求孵化用水的含氧量不低于5毫克/升。同時還要求保證卵或苗不堆積,否則即使在高溶氧量的水中也會出現(xiàn)缺氧窒息而死亡。
5.流水 流水孵化時,流速大小決定水中氧氣含量的多少和受精卵的分布密度。流速過緩,卵會沉積窒息死亡。過快,會使卵膜過早破裂,胚胎死亡。所以,在孵化過程中,水流調控是一項非常重要的工作。水的流速可根據水的交換情況進行調節(jié),一般以15分鐘交換一次為快,以3040分鐘交換一次為慢。放卵時,要求卵能隨水逐流,保證胚胎對氧氣的需要。隨著胚胎的發(fā)育,胚胎對氧氣的需要量也將越來越大,必須逐步增大流速。出膜時,則應適當減緩流速,以提高孵化酶的濃度。出膜后魚苗活力弱,大部分時間在水體下層,為避免魚苗堆積水底而窒息死亡,流速要適當增加,以利于魚苗的漂浮和均勻分布。
?。ㄋ模┦芫?、孵化率和出苗率
1.受精率 一般在胚胎發(fā)育至原腸中、晚期計算受精率。隨機抽取魚卵200500粒,放于培養(yǎng)皿中,數(shù)出總卵數(shù)和正常的受精卵數(shù)(重復計數(shù)幾次),計算出正常發(fā)育的好卵數(shù)占總卵數(shù)的百分比,即為魚卵的受精率。
受精率=(受精卵數(shù)÷總卵數(shù))×100%
2.孵化率 為了提高孵化管理水平,必須計算孵化率。
孵化率=(孵出魚苗數(shù)÷受精卵總數(shù))×l00%
3.出苗率 生產上真正的孵化率難以計算,生產上主要是計算出苗率。出苗率即出苗數(shù)占受精卵總數(shù)的百分比。
出苗率=(出苗數(shù)÷受精卵總數(shù))×100%
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