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對(duì)硫磷完全抗原的合成鑒定及其免疫效果

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  對(duì)硫磷為無(wú)色無(wú)臭的液體,是廣譜性殺蟲(chóng)劑,具有觸殺、胃毒、熏蒸的作用,但是如果人吸入或食入,會(huì)導(dǎo)致中毒,嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致死亡。近日,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院研究人員發(fā)表論文,旨在合成免疫原性較強(qiáng)的人工抗原,為制備對(duì)硫磷單克隆抗體和建立免疫快速檢測(cè)食品中農(nóng)藥殘留方法奠定基礎(chǔ)。

  研究指出,成功合成2種對(duì)硫磷完全抗原,免疫Balb/c小鼠PA-2-BSA組免疫應(yīng)答效果好于PA-1-BSA組。該文發(fā)表在2013年第01期《解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志》上。

  選用2種方法合成羧基化對(duì)硫磷:一種以對(duì)硫磷為原料,改造硝基一端;另一種以三氯硫磷為原料,改造磷硫鍵一端。EDC法偶聯(lián)牛血清白蛋白(BSA)制備免疫原(PA-1-BSA和PA-2-BSA),并分別免疫Balb/c小鼠。間接ELISA測(cè)定抗血清效價(jià),競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定檢測(cè)靈敏度,比較免疫效果。

  SDS-PAGE電泳表明,2種完全抗原均合成成功;質(zhì)譜法鑒定免疫原的偶聯(lián)比分別為:N(PA-1/BSA)=7.2,N(PA-2/BSA)=15.4;小鼠抗血清經(jīng)間接ELISA檢測(cè)表明,PA-2-BSA組效價(jià)明顯高于PA-1-BSA組;間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)表明,PA-2-BSA組半數(shù)抑制濃度(IC50)為1μg/ml,明顯優(yōu)于PA-1-BSA組(IC50為>100μg/ml)。

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