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外部形態(tài)鑒定
定義及分類:根據(jù)玉米品種的種子、幼苗和植株外部形態(tài)的差異鑒定品種,分為種子形態(tài)鑒定法、幼苗形態(tài)鑒定法和田間種植鑒定法等。
種子形態(tài)鑒定法特點(diǎn):簡單、方便、快速,在傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用普遍,但可供鑒定的種子性狀少且易受種子成熟度、種子生產(chǎn)生態(tài)環(huán)境和種子貯藏等條件影響,鑒定結(jié)果具有一定的主觀性。品種間種子形態(tài)差異越來越小,鑒定形態(tài)差異來辨別種子越來越困難,準(zhǔn)確性也越來越低。
幼苗形態(tài)鑒定法特點(diǎn):所需試驗(yàn)設(shè)備及操作簡易、成本低,但能用于品種鑒定的幼苗特異性狀較少,所以只能用于有明顯差異品種間的鑒定。
田間種植鑒定法特點(diǎn):具有合法性、科學(xué)性、準(zhǔn)確性等優(yōu)點(diǎn),是進(jìn)行品種真實(shí)性鑒定結(jié)論判定的最終方法,但周期性長、時(shí)效性差、工作量大,不能滿足現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及種子貿(mào)易中快速鑒定的要求。
蛋白質(zhì)指紋圖譜法
定義與分類:利用電泳技術(shù)對(duì)待檢測樣品的種子或幼苗的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、染色,形成蛋白質(zhì)電泳圖譜,與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行比較,來鑒定品種。包括同工酶電泳、種子貯藏蛋白電泳法等。
同工酶電泳法特點(diǎn):目前,已有30多種同工酶用在作物品種鑒定中,最常用的是脂酶同工酶和過氧化物同工酶等。同工酶電泳雖然比形態(tài)鑒定更加快速,但同工酶具有植物組織及器官特異性,受個(gè)體發(fā)育及生態(tài)環(huán)境的影響,且一些種類的同工酶在提取和分離過程中容易失去活性。
種子貯藏蛋白電泳法特點(diǎn):在品種鑒定上應(yīng)用較多的是醇溶蛋白(和谷類)和球蛋白(豆類)。該方法直接從種子中提取蛋白質(zhì),操作技術(shù)簡單,結(jié)果相對(duì)穩(wěn)定,但是隨著近親品種的不斷涌現(xiàn),尋找品種鑒定用的特異蛋白的難度增大。
DNA指紋圖譜法
定義與分類:學(xué)名為DNA分子標(biāo)記鑒定法,通常也稱為DNA指紋圖譜法,種類較多,當(dāng)前在農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中常用的方法為簡單重復(fù)序列(SSR)標(biāo)記法。
SSR標(biāo)記法通常是指以2個(gè)——5個(gè)核苷酸為單位串聯(lián)重復(fù)不同次數(shù)形成簡單重復(fù)序列,在不同品種的基因組DNA中簡單重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)有差異,這種差異可以通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增及電泳法進(jìn)行檢測,從而能夠區(qū)分不同品種。
SSR標(biāo)記法特點(diǎn):SSR標(biāo)記廣泛、隨機(jī)、均勻的分布在基因組中,可以提供整個(gè)基因組的遺傳信息,參與遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變、基因調(diào)控等過程,能夠直接反應(yīng)品種遺傳物質(zhì)在DNA水平上的差異。具有準(zhǔn)確性高、多態(tài)性高、檢測重復(fù)性好、操作簡便、經(jīng)濟(jì)、不受季節(jié)和環(huán)境影響等特點(diǎn)。以SSR標(biāo)記法為主,形態(tài)鑒定方法為輔,能夠更高效、更準(zhǔn)確進(jìn)行品種鑒定。
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